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支原體污染PCR檢測試劑盒檢測支原體污染靈敏度高使用方便涵蓋所有常見支原體污染種類

CAS號	0-00-0
規(guī)格	20次反應	純度	實驗室純度
貨號	Myco-P-50	貨期	3天
品牌	炎熙生物	庫存	10000包
規(guī)格	20次反應
純度	實驗室純度
貨號	Myco-P-50
貨期	3天
品牌	炎熙生物
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參考價：￥548.00 元/包

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產(chǎn)品詳情

詳細信息(中文)：
支原體污染PCR檢測試劑盒
PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination

貨號規(guī)格
Myco-P-20 20次反應
Myco-P-50 50次反應
Myco-P-100 100次反應

支原體污染PCR檢測試劑盒，用于檢測細胞培養(yǎng)中的支原體污染，也可作為支原體通用檢測試劑盒使用，可檢測屬于柔膜菌綱(Mollicutes)的支原體、脲原體、無膽甾支原體、螺原體、蟲原體、中間原體等超過一百種，與柔膜菌綱以外的其他微生物沒有特異性反應。
支原體是一種直徑約為0.1-0.3 μm、無細胞壁的原核生物，具有變形能力，屬于柔膜菌綱，常被用作柔膜菌綱的統(tǒng)稱。支原體是最小的具有完整細胞結(jié)構的生物，可透過常見過濾膜（0.22-0.45 μm），因此常規(guī)的無菌過濾方法不能將其去除，靶向細胞壁的抗生素也對支原體無效。支原體種類繁多，通常為寄生性或腐生性，有些種類可作為正常共生菌存在，有些種類具有致病性，還有一些種類具有細胞侵入性。
支原體污染是基礎研究和工業(yè)生產(chǎn)中一個很常見的問題，據(jù)報導，有5-35%的細胞株受到污染；一些實驗室由于對此不夠重視，實際上可能有高達80%以上的細胞株發(fā)生支原體污染。支原體在光學顯微鏡下不可見，對培養(yǎng)基的需求有限，一般不會引起培養(yǎng)物混濁，因此細胞被支原體污染一般難以察覺。支原體污染能消耗營養(yǎng)物，促進代謝積累，導致pH改變，誘導或抑制細胞因子表達，并改變培養(yǎng)細胞的代謝、增殖特征及形態(tài)。由于支原體污染能影響幾乎每一個細胞參數(shù)，所以很多研究都強調(diào)常規(guī)檢測正在培養(yǎng)的細胞，以確保觀察到的結(jié)果不被支原體污染所損害。
目前已知的支原體種類約200種，污染細胞培養(yǎng)物的支原體種類有20多種。其中95%的污染是由五種支原體引起：精氨酸支原體（Mycoplasma arginini），發(fā)酵支原體（Mycoplasma fermentans），豬鼻支原體（Mycoplasma hyorhinis），口腔支原體（Mycoplasma orale）和萊氏無膽甾原體（Acholeplasma laidlawii）。精氨酸支原體和萊氏無膽甾原體為牛源性，主要由牛血清帶入；豬鼻支原體主要由胰酶（通常來源于豬）帶入；發(fā)酵支原體和口腔支原體為人源性，主要由實驗操作人員帶入，人源性的支原體污染還包括唾液支原體和人型支原體。原代細胞的支原體污染占比不到1%，但是種類最多，已知有17種支原體，主要為鼠、禽和犬來源的支原體，如雞毒支原體（Mycoplasma gallisepticum）、關節(jié)炎支原體（Mycoplasma arthritidis）、肺支原體（Mycoplasma pulmonis）、犬支原體（Mycoplasma canis）等，一般是從原始的動物組織中帶入進來，因此種類比較多，并且有不確定性。歐洲藥典（EUROPEAN PHARMACOPOEIA）2.6.7指定了六種需檢測的支原體：萊氏無膽甾原體，雞毒支原體，豬鼻支原體，口腔支原體，肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae）和滑液支原體（Mycoplasma synoviae）。由上述內(nèi)容可知，引起細胞污染的支原體種類較為繁雜，并且可能存在未知種類，因此使用支原體通用性PCR引物更適合檢測支原體污染的需要，可以避免使用物種特異性引物可能導致的漏檢情況。
本試劑盒采用支原體通用性引物，可檢測上述提及的全部支原體，最低檢測極限（LOD，100%檢出時的最低模板濃度）為反應液中10個支原體基因組，能在2到3小時內(nèi)獲得可靠的結(jié)果，是一種靈敏度高、特異性強、快速的檢測支原體污染的方法，具有以下特點： ①特異性引物是針對高度保守的支原體16S rRNA序列設計的，可用于檢測非常廣泛的支原體種類，不受真核細胞或細菌DNA干擾。經(jīng)本試劑盒測試的支原體菌株涵蓋了所有常見的支原體污染種類； ②靈敏度極高，最低檢測極限僅需10個拷貝的支原體基因組； ③陽性對照所用引物與支原體檢測相同，可幫助判斷假陰性現(xiàn)象，避免假陰性導致的誤判； ④包含PCR反應所需的所有成分，只需進行一次PCR反應，降低了交叉污染的幾率，使用方便。
目前美國、歐洲、日本的藥典仍然推薦體外培養(yǎng)法作為檢測支原體污染的金標準。培養(yǎng)法通過使用選擇性培養(yǎng)基，可以達到很強的特異性，并且有很高的靈敏度，但是其缺點在于操作比較繁瑣，且耗時較長，完成一個完整的檢測需28天之久。對于大多數(shù)實驗而言，這是一個不可承受的時間成本。PCR檢測由于其特異性強、靈敏度高，且快速的特點，成為培養(yǎng)法的良好替代方案，正逐漸被世界各國所接受。
由于支原體污染比較隱蔽，所以建議給細胞定期做支原體檢測，以免在未察覺的情況下給您的實驗造成影響?？晒﹨⒖嫉淖龇ㄊ牵涸谛录毎M入實驗室時，以及細胞凍存入庫前，都應該做一下支原體